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                  波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒實驗反應五要素

                  點擊次數:1119  更新時間:2021-03-03

                  波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒實驗反應五要素:

                  參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
                  引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
                  ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
                  ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
                  ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
                  ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
                  ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
                  ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
                  ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
                  引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

                  綿羊白介素2(IL-2)elisa試劑盒
                  綿羊主要組織相容性復合體(MHC)elisa試劑盒
                  綿羊白介素6(IL-6)elisa試劑盒 
                  綿羊白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒
                  綿羊白介素1(IL-1)elisa試劑盒
                  綿羊補體片段3b受體(C3bR)elisa試劑盒
                  綿羊白介素2受體(IL-2R)elisa試劑盒
                  猴白介素4(IL-4)elisa試劑盒
                  猴白介素2(IL-2)elisa試劑盒
                  猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒 
                  猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒
                  猴透明質酸(HA)elisa試劑盒 
                  猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa試劑盒
                  猴B病毒(BV)elisa試劑盒
                  猴載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒 
                  猴載脂蛋白A1(apo-A1)elisa試劑盒 
                  猴白介素6(IL-6)elisa試劑盒
                  猴γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒
                  猴胰島素(INS)elisa試劑盒 

                   

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