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                  ELISA常見10個問題

                  點擊次數:1118  更新時間:2015-11-25

                  1. 產品有哪幾種規格?可檢測多少個樣本?

                      產品分為48T和96T兩種規格。ELISA試劑盒

                      每次實驗的標準曲線一般設7個不同濃度,加上空白孔,標準曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒zui多可以測定40個樣本(不做重復且一次用完),一個96T試劑盒zui多可以測定88個樣本(不做重復且一次用完)??梢愿鶕嶋H樣本數量和實驗計劃選擇合適的產品規格。

                  2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?

                      48T和96T的試劑盒,每個孔的反應體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規格,詳見說明書。

                  3. 產品的穩定性如何?

                      產品在前期已通過嚴格的穩定測試,發貨前亦須通過檢測并提供質檢報告,在市場上深受廣大客戶的贊許!

                  4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒?

                      酶活力的測定實際上就是測定酶促反應的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示,單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法:⑴測定完成一定量反應所需的時間,⑵測定單位時間內酶催化化學反應量。主要通過產物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵熒光法,⑶同位素測定法,⑷電化學法。

                      ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進行定性和定量的檢測,所以酶活性是不能用ELISA來檢測的。

                  5.一次ELISA實驗需要多長時間?

                      雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要4-4.5小時,競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。

                  6.血清樣本如何處理?

                      全血標本于室溫放置2小時或4℃過后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。ELISA試劑盒

                  7. 血漿樣本如何處理?

                      應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

                  8. 尿液樣本如何處理?

                      用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

                  9.細胞上清液樣本如何處理?

                      檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

                  10.   組織樣本如何處理?

                      用預冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測。ELISA試劑盒

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